Мы уже писали про то, что производители пищевых продуктов используют трансглутаминазу и не боятся, что их поймают. Ведь поставщики фермента убедительно рассказывали о том, что при термообработке он инактивируется и его невозможно обнаружить.
Так продолжалось долгое время, пока компания «Хема» не представила российскую методику определения микробной трансглутаминазы (мТГ) в продуктах питания.
Методика прошла аттестацию и ее взяли на вооружение контролирующие органы и общественные организации. Многие компании приезжали в гости в офис «Хемы» и привозили свою продукцию и сыпучие ингредиенты (белые порошки). Кто-то проверял на своих комплексах, действительно ли работает методика, кто-то хотел проверить мясопродукты и входящее сырье на незадекларированную поставщиками мТГ.
Возить весь ассортимент продукции на ИФА-методику дороговато (мы не про себестоимость реактивов, а про услуги лабораторий «на круг») и требует времени. Вот почему «Хема» выпустила иммунохроматографический (ИХА) тест качественного выявления антигена мТГ в пищевых продуктах и смывах. Сразу оговорюсь – он не имеет никакой юридической силы, но это не мешает его использовать. Он работает. Он верен. У него хорошая чувствительность, практически не уступающая официально признанному ИФА-методу. Это как тест на беременность – если появились две полоски, все равно справку на работу получать надо в женской консультации.
Как это работает?
Тест-полоски для ИХА удобны и просты в использовании, при этом имеют сложное строение, а процесс разработки каждого вида ИХА является высокотехнологичным.
Метод иммунохроматографии использует для перемещения антигенов и антител капиллярные силы. Его принцип можно рассмотреть на примере «сэндвич»-формата, который часто применяется для определения опухолевых маркеров.
«Первые» антитела против целевого антигена «привязаны» к шарикам коллоидного золота и высушены в виде активной зоны.
Образец вносят на один из концов тест-полоски так, чтобы под воздействием капиллярных сил все составные части двигались через активную зону. При этом шарики коллоидного золота «захватывают» целевой антиген антителами и весь комплекс движется дальше.
В так называемой тестовой зоне (Т-зоне) на тест-полоске высушены «вторые» антитела к целевому антигену. При прохождении через эту зону шариков с коллоидным золотом с захваченным антигеном образуется «сэндвич», видимый в виде окрашенной линии.
В так называемой контрольной зоне (С-зоне) на тест-полоске высушены антитела, которые способны захватить любые другие антитела, вне зависимости от связывания целевого антигена. Часть шариков с коллоидным золотом, которая не связалась в Т-зоне, обязательно связывается в С-зоне и формирует вторую окрашенную линию.
Таким образом, при наличии в образце целевого антигена образуются ДВЕ окрашенных линии. Если же целевого анигена в образце не было, видна только одна линия в С-зоне. Стоит отметить, что если вторая линия читается с трудом, то это все равно является положительной пробой.